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但是使用PVDF膜前，一定要先用無水甲醇預處理，再在transfer buffer中平衡好才可以使用（PVDF膜用甲醇泡的目的是為了活化PVDF膜上面的正電基團，使它更容易跟帶負電的蛋白質結合）。經過預處理的PVDF膜在轉膜時，可以使用不含甲醇的transfer buffer。而使用NC膜時，有的需要用無水甲醇處理，有的則不必，直接用transfer buffer平衡好就可以了。
